Замразяването е метод на съхранение на тъкани и клетки за продължителен период от време, в течен азот при температура от минус 196°С.

Замразяването на сперматозоиди се извършва с помощта на специална среда чрез т.нар. бърз метод. Замразени, те могат да бъдат съхранявани десетки години, без риск от увреждане. При необходимост, сперматозоидите се размразяват по определен начин, след което се активират със специфични среди и се инжектират в матката чрез т.нар. метод на контролирана вътрематочна инсеминация (IUI). Замразяването на семенна течност се прилага с цел съхранение на сперматозоиди за донорската програма, улесняване на брачната двойка при лечение на безплодието, или при мъже с предстояща лъче- или химиотерапия по повод малигнени заболявания.

За разлика от сперматозоидите, ембрионите са много раними при процедурите на замразяване и размразяване – обикновено около 10-20% от тях не оцеляват при замразяване и последващо размразяване. Това е причината да бъдат замразявани само ембриони с добро качество (степен I и II) и криопрезервация да се прилага само когато след ембриотрансфера са останали достатъчен брой ембриони с добро качество. По този начин, при неуспех на процедурата по оплождане ин витро, съществува възможност за извършване на ембриотрансфер на замразени/размразени ембриони в последващ нестимулиран цикъл.

Този метод се прилага и при тежки форми на яйчников хиперстимулационен синдром, когато една евентуална бременност би задълбочила критичното състояние на жената. Именно поради тази причина не се извършва ембриотрансфер и всички ембриони се замразяват. Съществуват два основни метода за замразяване на ембриони – бавно замразяване и бързо замразяване (витрификация).

Криопрезервацията по т.нар бавен метод се извършва с компютърно контролиран замразител със средна скорост 1°С/3 мин. Използват се специфични среди с криопротектанти, предизвикващи извличане на течностите и предпазващи ембрионите от неблагоприятните въздействия на ниските температури.

В последните години все по-голямо приложение в асистираната репродукция придобива бързото замразяване. Витрификацията е свръхбърза техника за замразяване, която довежда до образуване на стъклоподобно състояние в живите клетки, като по този начин се избягва формирането на ледени кристали по време на замразяване и размразяване. Основните предимства на витрификацията са елиминиране на механичните повреди, предизвикани от вътре- и външноклетъчното образуване на ледени кристали и намаляване на уврежданията, вследствие продължителното и бавно излагане на постоянно намаляващи температури. Витрификацията съчетава висока скорост на замразяване и високи концентрации на криопротектанти. Поради спецификата на метода, той изисква добри технологични умения и опит. В Медицински център по репродуктивна медицина и оплождане ин витро „София“ се прилага витрификация на ембриони на различен стадий от тяхното развитие. При размразяване на ембриони, замразени чрез витрификация се постигат над 95% преживяемост на ембрионите и успеваемост на ембриотрансфера, подобна на тази при използване на незамразени ембриони.